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質粒使用和保藏方法

發布日期:2017-01-07

簡要介紹

   本公司提供的質粒有三種類型:質粒、甘油菌和穿刺菌。客戶可以根據自己的喜好自由選擇其中一種。質粒形式:冰袋運輸。長期保存條件-20度。儲存時間長,可達到5年之久。需要轉化感受態細胞擴增質粒。甘油菌形式:常溫運輸。長期保存條件-80度。-80度條件下可以保存5年之久。可直接培育繁殖抽提質粒。穿刺菌:常溫運輸,可用順豐航空快遞,到貨時間快。保存條件為4-10度。保存時間6個月。可直接培育繁殖抽提質粒。

使用方法

質粒形式使用方法:

1)制備轉化感受態細胞;(2)熱擊法轉化感受態細胞;(3)挑取單克隆,培養單克隆并抽提質粒。

甘油菌使用方法:

1)配置LB培養基,LB液體培養基配方:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化鈉(NaCl) 10g/L pH7.4 ,滅菌后,加入相應的抗生素;

2)接種100ul1-3ml的含抗生素的培養基中,37度,220rpm培養18小時以上;

3)使用質粒抽提試劑盒抽提質粒。

穿刺菌使用方法:

1)配置LB培養基,LB液體培養基配方:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化鈉(NaCl) 10g/L pH7.4 ,滅菌后,加入相應的抗生素;

2)接種100ul1-3ml的含抗生素的培養基中,37度,220rpm培養18小時以上;

3)使用質粒抽提試劑盒抽提質粒。

菌種保藏方法:

注意要做好含質粒的菌種保藏工作,保存方法為甘油菌形式,-80度保藏。

 

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