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菌種 NMY51酵母 酵母雙雜交配套菌種 基因工程菌種 包郵
 
   
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菌種 NMY51酵母 酵母雙雜交配套菌種 基因工程菌種 包郵

  • 貨  號:NMY51
  • 品  牌:SHBCC
  • 銷售價: ¥500.00
購買數量:
  (庫存444)
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菌種名 NMY51酵母
拉丁名  
編號  
基因型 MATa, his3Δ200, trp1-901, leu2-3, 112, ade2, LYS2::(lexAop)4-HIS3, ura3::(lexAop)8-lacZ, ade2::(lexAop) 8-ADE2, GAL4
代數 2
運輸形式 固體培養基上生長
特征 DUAL membrane系統是DUAL systems BioTech公司開發的專門篩選跨膜蛋白間相互作用的檢測技術,它利用分離的泛素系統 (split-ubiquitin)直接檢測天然狀態下膜蛋白間的相互作用,是目前市面上唯一檢測膜蛋白間相互作用的酵母雙雜系統。此系統采用NMY51酵母菌株,可直接轉化質粒進行蛋白互作驗證或篩庫試驗;此菌株Transformation marker為:trp1leu2-3,報告基因為:HIS3ADE2 lacZ,第一步通過營養缺陷型報告基因 (HIS3ADE2)進行選擇性生長篩選,進一步通過 LacZ報告基因進行β-半乳糖分析顯色的定量或半定量篩選,三個獨立的報告基因,受不同啟動子的調控,降低假陽性幾率。原理:泛素 (ubiquitin)分子量很小,由 76 aa殘基組成;泛素作為降解信號分子,可以連接另外一種蛋白質的 N端,然后被泛素專一性蛋白酶 (UBPs)識別,從而導致與泛素相連的蛋白被酶解。泛素可以人為分成兩部分:N (Nub)C (Cub)。首先,人為地將泛素 Nub 3位異亮氨酸突變為甘氨酸 (NubI 突變為 NubG)。這樣與 Cub的親合力大大降低,避免了 Cub Nub自我結合或接近的可能性。其次,將Cub部分與人工合成的 LexA-VP16轉錄激活因子融合成一個融合蛋白Cub-LexA-VP16。正常條件下 NubG不與Cub 結合,UBPs也不能識別分離的泛素,轉錄激活因子也不會被切下來。最后,將要檢測的蛋白質分別與NubGCub融合,形成 bait融合蛋 (bait-cub-LexA-VP16) prey融合蛋白 (prey-NubG)。如果 bait prey發生相互作用,就會促使 NubG Cub的相互接近,被 UBPs識別,導致 LexA-VP16的解離,進入核內,從而激活報告基因的轉錄。 此系統可使用四種Bait質粒:pBT3-NpBT3-SUCpBT3-STEpBT3-C,篩選標志均為LEU;三種Prey質粒:pPR3-C pPR3-SUCpPR3-STE,篩選標志均為TRP
保存 含30%甘油菌液放于-80度可長期保存
培養基 YPD培養基
用途 酵母雜交

 

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